主题最新回顾(发布时间:2017-3-10 11:43:00) |
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-- 作者:czbiogen
-- 常州百代生物BIOG细胞DNA提取试剂盒说明书 BIOG细胞DNA提取试剂盒说明书 运输条件:常温运输 货 号:51011: 50次反应 51012: 100次反应 储存条件:室温(15-25℃)消化液请于-20℃存放 产品特点 ◎操作简便快速,可在20分钟内完成提取过程; ◎提取DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.7-1.9; ◎产率高,同样的样本量提取的DNA更多; ◎标本范围宽,适合于各种培养细胞、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本 试剂盒组成
产品介绍 BIOG DNA Cell Kit是专门用于从各种细胞样本中提取基因组DNA的试剂盒。提取的样本范围包括各种培养细胞、细菌、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本。BIOG DNA Cell Kit采用复合消化液消化细胞中的蛋白质,使细胞DNA更容易释放出来,因而本试剂盒DNA提取产率较高。BIOG DNA Cell Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方,提取得到的DNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。
操作步骤: 1. 请自行准备:无水乙醇、PBS及1.5mL离心管。 2. 取出析出液和洗涤液,按以下操作: a) 析出液:4.5mL加入25.5mL无水乙醇;9mL加入51mL无水乙醇。 b) 洗涤液:9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇。 c) 配制好的析出液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。 3. 细胞处理:a) 培养板培养的单层贴壁细胞,弃培养基,PBS清洗一遍,弃PBS; b) 培养瓶培养的贴壁细胞应先用胰酶消化,处理为细胞悬液, 1,000 rpm 离心 5分钟,彻底弃去上清,加入100μL PBS振荡至细胞悬浮; c) 培养的细胞为悬浮细胞,1,000 rpm 离心 5分钟,彻底弃去上清,加入100μL PBS振荡至细胞悬浮。 4. 加入200μL裂解液,20μL消化液A,振荡混匀,室温放置5分钟。 5. 加入20 μL 消化液B,充分振荡混匀,56℃水浴10 分钟至细胞完全裂解。 6. 加入500μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。 7. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,静置2 分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。 8. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。 9. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 分钟,离去残留的洗涤液。 10. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入50-200 μL 洗脱液,静置3分钟,12,000 rpm 4℃ 离心2分钟,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。 注意事项: 1. 析出液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。 2. 细胞量建议不高于107。 3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于37℃水浴中溶解即可。
储存、运输和有效期 本试剂盒可常温运输,室温(15-25℃)保存,有效期为12个月,消化液请于-20℃存放,避免反复冻融。 质量控制 本产品经严格的质量检验证明,无生物污染 注意 本产品仅用于科研 |