主题最新回顾(发布时间:2017-3-10 10:44:00) |
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-- 作者:czbiogen
-- 常州百代生物BIOG粪便RNA提取试剂盒说明书 BIOG粪便RNA提取试剂盒说明书 运输条件:常温运输 货 号:51035: 50次反应 51036: 100次反应 储存条件:室温(15-25℃)消化液请于-20℃存放,裂解液Ⅰ请于4℃存放. 产品特点. ◎操作简便快速,粪便预处理后,可在15分钟内完成操作; ◎提取RNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.8-2.0; ◎产率高,同样的样本量提取的RNA更多;. 试剂盒组成
产品介绍 BIOG RNA Stool Kit是我公司研发团队专为从粪便中提取基因组RNA而设计,适用于不同来源的固态或液态粪便样本。BIOG RNA Stool Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方,提取得到的RNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染,可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。 操作步骤: 1. 请自行准备:无水乙醇、PBS、1.5mL离心管。 2. 取出析出液和洗涤液,按以下操作: a) 析出液:4.5mL加入25.5mL无水乙醇;9mL加入51mL无水乙醇。 b) 洗涤液:9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇。 c) 配制好的析出液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。 3. 取200mg的粪便于试管中(若粪便样本为液态,取200μL于试管中),加入2mL PBS充分振荡混匀,300g离心5分钟,收集上清;取收集的上清液1mL于1.5mL离心管中,12000 rpm离心5分钟,弃上清后沉淀用1mL PBS重悬,振荡混匀后,12000 rpm离心5分钟,收集沉淀。 4. 加入200μL裂解液Ⅰ,悬浮沉淀,37℃放置30分钟。 5. 加入200 μL 裂解液Ⅱ,20μL消化液,充分振荡混匀,56℃水浴10分钟。 6. 加入600μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响RNA的提取与后续实验。 7. 将吸附柱放入收集管内,取上述溶液600μL转入吸附柱内,静置2 分钟,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。 8. 将剩余400μL液体转入上述吸附柱内,重复操作步骤7。 9. 将吸附柱放回收集管内,加500μL洗涤液至吸附柱内,12,000 rpm 4℃离心1 分钟,弃收集管内废液。 10. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 分钟,离去残留的洗涤液。 11. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入30-100 μL洗脱液,静置3分钟,12,000 rpm 4℃ 离心2分钟,收集RNA溶液。提取的RNA-70℃保存,或直接用于下一步实验。 注意事项: 1、 析出液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立 即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。 2、裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于37℃水浴中溶解即可。
储存、运输和有效期 本试剂盒可常温运输,室温(15-25℃)保存,有效期为12个月,消化液请于-20℃存放,避免反复冻融,裂解液Ⅰ请于4℃存放。
质量控制 本产品经严格的质量检验证明,无生物污染 注意 本产品仅用于科研 |