标题：目前常用的几种细胞计数仪器存在的问题

目前生物医学领域应用的细胞计数仪器都存在一些问题，细胞计数准确度都不高。细胞计数的目的是确定细胞悬液里的细胞密度，要求真实、准确。细胞密度是单位体积内的细胞数。细胞密度由计数样本体积和样本体积里细胞数两个测量参数构成。两个测量参数有一个计量不准确，细胞密度就不准确。根据这两个测量参数，看看目前常用的几种细胞计数仪器存在的问题。

包括最常用的血球计数板，流式细胞计数仪，细胞自动计数分析仪，这三种类型的细胞计数方法，涵盖了现代生物医学领域细胞计数的基本技术和方法。三种类型细胞计数方法存在的主要问题是检测获得的细胞密度都不够准确，其次还存在两个问题：一是检验细胞样品不能回收再用，二是不能准确计数总量小于1000个细胞的样本。例如，极限稀释细胞克隆实验是研究细胞增殖、分化、凋亡的一种方法，需要准确计数几百个细胞，然后回收单个种植到培养孔内。上述三种细胞计数方法都做不到。

计数细胞获得一个准确的细胞密度，看起来很复杂，难度很大，实际上真正理解了细胞计数的目的和要求也不难解决。如果能够准确取一定量细胞样本，放到一个容器里，准确记录全部细胞，问题就解决了。怎样准确记录一个容器里的全部细胞？如果容器里有几百个细胞，无规律分布在底面上，用显微镜观察，全部准确计数出来不太可能，如果把容器底部分割成许多个方格，标出行列号，一个方格中只有几个细胞（不超过10个），很容易准确记录出来，既不会漏计，也不会重计，将各个方格里的细胞数汇总起来就是全部细胞数。实际上将细胞培养板底部标记上方格，用之替代血球计数板和Cellometer的细胞样品室，问题就解决了。