标题：[分享]胰酶消化传代的最佳浓度~是否应含EDTA~

 胰酶消化传代的浓度是多少？是否含EDTA？浓度？

胰酶消化传代的一般浓度为0.25%，部分细胞由于贴壁较紧，需要加0.53mM 的EDTA，如果做原代培养，胰酶的浓度需要做适当的提高。

细胞传代消化时所用胰酶浓度并不是越高越好，因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下，pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外，钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前，一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶，以便于将含血清的培养基冲洗干净，这样就能大大提高消化液的消化能力。

通常使用的消化液浓度为：
（1）０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ；
（2）０.２５％胰蛋白酶＋０.０３％ＥＤＴＡ。
（3）0.25% 胰蛋白酶
溶液ｐＨ８.０～９.０；使用Ｄ－Ｈａｎｋ液配制。  
多数细胞传代消化可使用０.０５％胰蛋白酶＋０.０２％ＥＤＴＡ这种消化液。  

（上海钰森生物 usen2003 ）