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蛋白质测定:
蛋白质的定量分析是生物化学和其他生物学、食品检测、临床诊断等领域中最常设计到的分析检测手段。由于蛋白质种类很多,分子组成、结构、分子量差别很大,功能各异。
BECKMAN公司使用8种最常用的测定蛋白质的方法:例如:1,.Biuret(双缩脲法)、2.Bradford(考马斯亮兰G-250染色法) 3.Lowry H s(高灵敏度法) 4. Lowry Ls(低灵敏度法
)5.UV法(紫外法) 6. BCA 法
. Colloidal Gold (胶金法) .8. User defined 法(用户自行设定分析波长)
1,.Biuret(双缩脲法)
双缩脲反应,肽、蛋白质与二价铜离子在碱性溶液中形成紫色络合物。最大吸收波长540处,可测定含10-1200ug/ml蛋白质的样品,标准曲线的线性关系和重复性都较好。
2. Bradford(考马斯亮兰G-250染色法:
考马斯亮兰G-250,在酸性溶液中为棕红色,它和蛋白质通过疏水作用结合后产生颜色反应呈蓝色。在595nm处有最大的光吸收,在一定范围内,蛋白质含量与595nm的吸收值成正比,测定蛋白质浓度范围为1-140ug/ml,几乎无测定干扰。
核酸测定:
由于核酸通常和蛋白以及核蛋白的形式结合,所以在提纯核酸的过程中,要测定其中蛋白质杂质的含量。通过两个波长(260nm/280nm)的吸收度数比率和空白的校正,即可估算核酸的纯度。DNA比值为1.8. RNA比值为2.0对核酸来说,260nm/289nm的比值越小。说明蛋白杂质越多,核酸测定有5种可供选择,即四种制定的参数和1组通用法。指定参数法分别为:
1. 测定260nm/280nm及280nm/260nm的比率
2. 测定260nm/280nm及280nm/260nm的比率 背景校正波长320nm
3. 测定230nm/280nm及260nm/230nm的比率 背景校正波长320nm
4. 测定260nm/280nm及280nm/260nm的比率 用Warburg 和Christian系数计算蛋白质和核酸浓度。
5. 通用法的测定参数由用户自行设定。包括任意设定的波长和270nm通常用来进行酚含量的测定,所以可在通用法里设定这一波长,
DNA//Oligo Quant Analysis
这个定量软件包括9个预置好的程序
1. // Oligo DNA Long
2. /Oligo DNA Short
3. /Oligo RNA Long
4. / Oligo RNA short
5. ds DNA\
6. ss DNA
7. RNA\
1. 230//260 & 260/280 Rations&Conc
2. 230//260 & 260/280 Rations
酶机理研究软件:
通过酶促反应动力学研究,有助于了解酶与底物的结合机制和作用方式。
单组份定量分析软件
多组份分析软件
好,真好!