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DNAzol----一步法基因组DNA快速提取试剂盒
100ml
500元
产品描述:DNAzol 是一种完全的、可直接使用的基因组DNA 提取试剂,简单高效,结果可靠,可快速提取基因组DNA,适用于多种样品,大量或少量样品都可使用。DNAzol 可在一个步骤中裂解细胞并水解RNA,经过乙醇沉淀后即可快速得到基因组DNA。
整个过程只需10-30 分钟,DNA 回收率可达70-100%,得到的DNA 不需再纯
化,可直接用于Southern 杂交、点杂交、分子克隆、PCR 反应和其他分子生物学
应用。
注意:DNAzol 有毒害性,应避免直接接触皮肤和眼睛。
使用方法:
1. 裂解,匀浆
a. 组织。 25-50mg 组织加1ml DNAzol ,使用匀浆仪处理5-10 次。少量(5-10mg)
柔软组织,如脾或脑组织,可切成或者捣成小块使用微量取样器吹打混匀,室温放置5-10 分钟。
b. 细胞。单层培养的细胞应直接裂解,倒出培养基,加入DNAzol 用取样器吹打几次混
匀。每10cm2 细胞培养板加0.75-1.0ml DNAzol。
c. 细胞沉淀或悬浮液:每1-3X107 细胞(体积小于0.1ml)加1ml DNAzol,反复吹打混匀。
以上均要使用大口径枪头吹打,以免过度剪切断基因组。
2. 离心
4-25℃,10000g 离心10 分钟。将得到的上清转入新管。
此步骤去除组织碎片、部分水解的RNA 和多糖。如果所提样品为肝、肌肉和大部分植
物组织等含较多细胞和细胞外物质的样品,或要提取不含RNA 的DNA 时,可加此步骤。
其他样品可省略此步。
3. 沉淀
每使用1ml DNAzol 加0.5ml 100%乙醇,颠倒离心管5-8 次,混匀样品至出现DNA沉淀,室温放置1-3分钟。可以看见DNA 絮状沉淀,让沉淀自然沉降到管底,尽可能吸弃上清用枪头搅绕DNA贴附在离心管上端壁上,仔细吸弃剩下的管底和管壁的上清。如果因为剪切太厉害导致DNA成了小片段或者量少的DNA(少于15ug)无法缠绕到枪头上,可在4-25℃,4000g 离心1-2分钟沉淀DNA,弃上清。
4. 漂洗
用0.8-1ml 75%乙醇漂洗DNA 两次。漂洗时,将DNA 悬浮在乙醇中,颠倒离心管3-
6 次,然后静置0.5-1 分钟使DNA 沉降到管底,尽可能吸弃上清。
如果需要,可在4-25℃,1000g 离心1-2 分钟沉淀DNA。从组织中提取DNA 时,如需去除其他内含物,第一次漂洗可用70%DNAzol 和30%乙醇的溶液代替75%乙醇。
5. 溶解
用枪吸去残余的乙醇,晾干几秒中后立刻用8mMNaOH溶解DNA(如果DNA暴露于空气几秒钟都会大大加大溶解难度,因此乙醇晾后立刻溶解)。可将沉淀吸到大口径枪头中缓慢通过数次来帮助溶解。TE缓冲液和水溶解效果不完全,因此建议用碱溶液,可更快速且彻底的溶解。通常,从107 细胞或10-20mg 动物组织中提取的DNA 可用0.2-0.3ml 8mM NaOH溶解,使DNA 浓度约为0.2-0.3ug/ul。
如果从植物,肝脏,肌肉等富含糖原的材料提取DNA,最后可能会有一些残留物(多糖)无法溶解,可以用12,000Xg离心10分钟去除。
8mM NaOH容易被空气氧化,应该每月一次用不超过6个月的2-4mol的NaOH储存液配制。
结果检测:
以8mM NaOH溶液稀释DNA溶液(用DNAzol提取的DNA在Tris缓冲液中溶解效果不好)在紫外分光光度计检测A260/A280,A260 为1 相当于50ug 双链DNA/ml。得到的A260/A280
应为1.6-1.9,片段大小为20-100kb。得到的DNA 片段大小取决于提取过程中机械外
力对DNA 的破坏程度。
公司名称:北京百泰克生物技术有限公司
简介:目前公司已推出了系列生命科学试剂及常用生化试剂。如核酸提取与纯化试剂盒、DNA分子量标准、基因克隆与表达纯化、Western-blot相关试剂及蛋白质研究试剂等系列产品,产品稳定性强,质量达到或超过国际同类产品,但价格远远低于进口产品。部分产品如TRIpure总RNA提取试剂已通过了国家高新技术产品鉴定。
公司产品的上市,正逐步打破国外产品的垄断,为高校院所和生物产业的科学家提供了极大便利,并为国家节约大量外汇。百泰克生物广泛寻求与生物医药行业的各位同仁紧密合作,为国内外生物行业提供性价比最优越的产品,共同为中国生物科技的发展贡献力量。
联系人:马先生
手机:15801545462
电子邮件:mjb8455@163.com