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Bio-Rad公司近日宣布推出一款耐受PCR抑制剂的qPCR预混液——SsoAdvanced™ Universal Inhibitor-Tolerant SYBR® Green Supermix,能够从最具挑战性的样品中获得高质量的qPCR数据。从此,再也不用担心抑制剂了。
有些样品,比如植物或组织的裂解液、FFPE样品,因存在抑制剂而难以扩增。在这种情况下,PCR可能被高度抑制,让研究人员几乎无法获得可靠的数据,而浪费时间和费用。SsoAdvanced™ Universal Inhibitor-Tolerant SYBR® Green Supermix不仅具有Bio-Rad其他预混液的优势,还带来了耐受抑制剂的额外好处。
这款预混液的配方经过优化和验证,可耐受广泛的PCR抑制剂。这些抑制剂包括粗制裂解液中所存在的,多糖和多酚,以及样品制备中残留下来的各种试剂,如乙醇、异丙醇、EDTA和氯化钠。
与所有SsoAdvanced预混液一样,这个耐受抑制剂的版本也包括Bio-Rad的Sso7d-fusion聚合酶,它经过改造,可增强qPCR的性能。此外,这种预混液也与所有实时定量PCR仪兼容。
抑制剂的问题解决了,可是,有时样品不够怎么办?Bio-Rad也推出了一组预扩增试剂,SsoAdvanced™ PreAmp Supermix和PrimePCR™ PreAmp Assays。这款预混液能够对cDNA或gDNA进行目标特异的预扩增,而PrimePCR™ PreAmp Assays是经过验证的预扩增引物,可与预混液结合使用,确保最佳的qPCR扩增。
对于那些手头样品有限或希望同时拷问多个目标的研究人员而言,SsoAdvanced PreAmp Supermix再适合不过了。它能对低至100 pg的cDNA(或gDNA)进行1000倍目标特异的预扩增,且偏向极低。
SsoAdvanced PreAmp Supermix可与Bio-Rad的iScript™ Advanced或iScript Supermix逆转录试剂结合使用。研究人员首先分离出RNA,利用任一种iScript试剂合成cDNA,再将cDNA(或gDNA)与SsoAdvanced PreAmp Supermix及引物混合,开展PCR对感兴趣的目标进行预扩增。之后,此反应可用于实时定量PCR扩增和检测。
SsoAdvanced PreAmp Supermix经过验证,适用于SYBR Green、TaqMan探针,及定制设计的qPCR分析。
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