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国家“863计划”现代农业技术领域通过攻关筛选并设计了基于转化事情的通用核酸引物和探针,初步建立了转基因农产品品系特异性的精准检测技术体系。
通过查询网上公用数据库和转基因产品申报材料,系统收集并分析了我国批准商业化的25种转基因产品的信息资料。在此基础上,分析了外源插入载体边界序列的信息,根据边界序列设计了一系列的特异性引物,利用TAIL-PCR和测序等手段,分离、克隆和鉴定转基因产品的品系特异性序列。结合目前数据库中公布的部分转基因产品品系特异性序列,成功获得和收集我国商业化的19种转基因产品的品系特异性序列,分别是1种转基因大豆、8种转基因玉米、1种转基因番茄、7种转基因油菜、2种转基因棉花。
随机设计了一系列的寡核苷酸链,分别对这些寡核苷酸链进行网上数据库比对,选择与已有数据库序列同源性较低,尤其是与转基因植物及其外源基因序列同源性低的寡核苷酸链作为通用人工序列(UT),并用来设计通用双链荧光探针。通过仔细序列比对,选择了两条寡核苷酸链作为UT序列以及通用荧光探针的序列。在选择了合适的UT序列和双链荧光探针后,设计了一系列的靶序列特异性引物,对通用荧光定量PCR进行了优化,建立了通用荧光定量PCR反应体系。
来源:http:///kjbgz/200803/t20080324_59999.htm