标题：BIOGHSC一步法超级荧光定量PCR试剂盒（探针）说明书

产品特点

◎逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成，操作简便快速；

◎使用我们最新研发的超级热启动聚合酶，反应特异性更高，酶动力更强，特别适合多重PCR反应；

◎反应缓冲液经充分优化，灵敏度高，最低可检测1pg总RNA中的目标片段,特别适合低拷贝RNA的检测；                     

◎添加了百代生物RT-PCR专利活素，可明显提升RT-PCR的产量，CT值一般早3-5循环，S型曲线更加典型。

产品介绍  

BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit专为以RNA为模板的定量PCR检测而设计，适合荧光探针法定量PCR分析。使用BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit，逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成，中间无开管和移液动作，操作非常简便，也大大提高了实验的效率，并降低了反应的污染风险。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit使用我们最新研制优化的缓冲液，确保了反转录和定量PCR反应能够快速、高效地完成。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit的检测灵敏度可达到1pg总RNA，与其它品牌的同类产品相比，具有更高的检测灵敏度。各反应成分以 Mix的形式提供，非常方便实验者使用。

产品成分                                                     反应体系 

说明：1、BIOGHSC Super MultiProbe Mix包含dNTP Mix和Mg2+，BIOGHSC Super Enzyme Mix包含BIOG超级逆转录酶和BIOG超级热启动聚合酶、荧光保护素。2、一般来说反应体系中引物终浓度为0.3μM可得到较好的扩增效果。进行多重PCR反应时，不同靶基因引物的浓度搭配可以在0.1-1.0μM范围内进行实验优化。 3、TaqMan探针终浓度可以在0.1μM-0.45μM之间调整，进行多重PCR反应时，不同靶基因探针的浓度搭配应进行实验优化。4、qPCR反应灵敏性高，模板量的准确性对结果影响很大，建议将模板适度稀释后加入，或用50ul反应体系。5、模板体积最好不超过反应体积的10%。6、扩增产物长度请选择在100bp-500bp范围内，最好为100-200bp。 7、配制反应体系时，避免震荡混匀，以防气泡产生。8、反应条件：先于42℃逆转录反应20分钟，再于95℃加热10分钟，以激活热启动DNA聚合酶，然后95℃ 15秒，60℃ 35秒，35-40个循环。该反应条件可根据目标片段的大小、引物的Tm值、检测基因的多少等适当调整。8、如果模板具有复杂二级结构，可将反应温度提高至55℃，有助于提高产量。