标题：禽流感病毒抗体ELISA检测试剂盒

临床意义

禽流感是由禽流感病毒(Arian influenza virus ,AIV)引起的一种禽类急性高度致病性传染病。本病以急性败血性死亡到无症状带毒等多种病症为特点，禽类感染后体内会产生特异性抗体。检测特异性禽流感病毒抗体可作为该病疫苗免疫状况及辅助诊断指标。

本试剂盒采用禽流感抗原作固相抗原检测鸡血清中的特异性禽流感病毒抗体。本试剂灵敏度高，特异性强，重复性好，操作方便快速，可分多次使用。

试剂组成

1.预包被板48T/96T;                         6.样本稀释液(5号液)1支;

2.酶结合物(1号液)1支;                      7. 终止液(6号液)1支;

3.洗涤液(2号液)1支;                         8. 阳性对照品1支;

4.底物(3号液)1支;                            9. 阴性对照品1支;

5.显色剂(4号液)1支;                        10.使用说明书1份;

操作程序

1.样本稀释：用样本稀释液(5号液)将待检血清按1:100稀释,如5ul血清＋500ul样本稀释液，充分混匀。阴、阳对照不用稀释。

2.加样反应：样本检测孔每孔分别加已稀释样本血清100ul。同时设阴性、阳性及空白对照各一孔，取阴性、阳性对照各100ul分别加入反应孔内，空白对照孔仅加入100ul样本稀释液(5号液)。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体，每孔加洗涤液(2号液)一滴，立即用蒸馏水注满，静置30秒后甩去，再直接用蒸馏水洗涤四次，甩去，拍干。

3.加酶反应：除空白对照孔外其余每孔加酶结合物(1号液)二滴，37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体，如上洗涤，拍干。

4.显色反应：加底物(3号液)和显色剂(4号液)各一滴，混匀，37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)一滴，混匀，终止反应（加终止液后蓝色会变为黄色）。

结果判断

1.肉眼观察：阴性对照接近无色，阳性对照呈明显黄色，表示试验有效。待检孔接近无色表示该标本为阴性，待检孔呈明显黄色表示该标本为阳性。

2.仪器判断：以空白对照调零用酶标仪于450nm（620nm作参比波长）读取O.D值，待检孔O.D值大于阴性对照2.1倍者为阳性。当阴性对照O.D值低于0.05时按0.05计算。

注意事项

1.试剂盒在2-8℃下保存，每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧，各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。

2.洗涤时将蒸馏水加满孔内，每次停放三十秒钟后甩去孔内液体。禁用自来水等其它水源。

3.为提高试验的可比性建议使用仪器判读结果，并对阴性对照测复孔以减少误差。