柱式DNA小量凝胶回收试剂盒
试剂盒组成及包装
50次 100次 200次
1、GS Buffer 25ml 50ml 100ml
2、Wash Buffer 25ml 50ml 100ml
3、EB 5ml 10ml 20ml
4、离心吸附柱 50个 100个 200个
5、废液收集管 50个 100个 200个
6、产品说明书 一份 一份 一份
二、实验准备:1.按照标签指示在Washing Buffer中加入无水乙醇,混匀,盖紧保存。
2.将水浴锅温度调到50℃。
三、实验操作步骤:
割下含DNA的琼脂糖胶块(TAE 或者TBE凝胶均可),使它尽可能的小,放入1.5ml 离心管中。
按照100mg胶块加入400ul GS Buffer的比例加入GS Buffer ,置50℃水浴10mins,使琼脂糖胶块完全溶化,每两分钟颠倒混匀一次。
(胶块浓度为0.8%-1%,高浓度的胶需要适当添加GS Buffer)
将溶化后的胶液转入到离心吸附柱,并将离心吸附柱置于废液收集管中,10,000rpm离心30s,弃去废液。
将离心吸附柱置回废液收集管中,加入500ul Washing Buffer(加入乙醇否?)于离心吸附柱中,10,000rpm 离心30s,弃滤液。以同样的方法再用500ul Washing Buffer溶液洗涤一次;
将离心吸附柱置回废液收集管中,最高速度离心1min,以弃净Washing Buffer。
小心取出离心吸附柱,将其套入一个无菌的1.5ml 离心管中,在吸附膜中央加入30ul EB(Eluent Buffer), 室温静置2-10m后,最高速度离心1min。
取出离心吸附柱,将1.5ml 离心管(DNA溶液)置于-20℃保存备用。
四、补充说明:
1.在紫外灯下切胶时,应尽量缩短操作时间,且一定要用长波长,因为紫外光能将核酸打断,尤其是短波长的紫外光。
2.胶的浓度过高时,请将其换算成0.8%-1%的胶浓度后加入GS Buffer,例如50mg 2%的琼脂糖胶块就需要加入400ul的GS Buffer。
3.琼脂糖凝胶和电泳液最好是新鲜配制的,这样可以保证切下胶块的pH值稳定。