标题：invitrogen博来霉素限时特价，满5支单价2150元！

产品描述：Zeocin™ 试剂是博来霉素抗生素家族的一个成员。 其抗性由编码一种 13,665 道尔顿蛋白质的 Shble 基因赋予。 在表达这种蛋白质的细胞中，Zeocin™ 无法结合和切割细胞 DNA。 Zeocin™ 对大多数好氧细胞有效，可用于选择哺乳动物和昆虫细胞系、酵母以及细菌。
使用方法

用途：Zeocin可选择Shble基因表达的细胞。

使用浓度：

* 普通大肠杆菌（25mg/ml，PH7.5，低盐LB培养基）；

* 动物细胞（100-750mg/ml）；

* 植物细胞（50-250mg/ml）；

* 酵母（50mg/ml）。

具体使用步骤：

一、建立杀灭曲线

1) 接种细胞密度约25%，按照8个平板/组准备，培养24h。

2) 更换含不同浓度Zeocin的筛选用培养基，Zeocin浓度可设置为0, 50, 100, 200, 400, 600, 800和1000 μg/ml，每个浓度做3个平行；或根据自身实验体系，设置不同浓度梯度。

3)3-4天更换新鲜的筛选培养基，并观察存活细胞的比例。选择在合适的时间（1-2周内）杀死大多数细胞的浓度为最佳工作浓度。【注】：若是难以在显微观察下区分活细胞，也可用台盼蓝染色来计算存活细胞的数量，以确定Zeocin的最适浓度。

二、筛选稳定转染细胞

1) 转染48-72h后，用含有最佳浓度Zeocin（由灭杀曲线确定）的新鲜培养基筛选细胞。为了更好的鉴定和筛选细胞集落，建议将细胞按比例稀释成一系列浓度。

【注】：若待筛选细胞对Zeocin的抗性明显强于大部分细胞，或者细胞快速分裂导致低浓度情况Zeocin的筛选效果不明显，按照以下方法克服此类耐性：a）将细胞直接用含Zeocin的筛选培养基进行分皿；b）37°C孵育2-3h直至细胞贴壁；c）从培养箱内取出细胞并于4°C放置2h，一定要确保培养基内含有HEPES。【此步的目的在于短时间内终止细胞分裂活动，从而允许Zeocin抗性得以发挥，杀死细胞。】c）细胞重新放回37°C培养箱内培养。

2) 每3-4天加入选择培养基，直到出现细胞集落。

3) 挑选并转移克隆到96或48孔板中。在进行更大孔径培养板或培养皿上扩大培养之前，确保培养细胞密度近100%。

三、维持培养稳定转染细胞

可采取以下方式维持培养稳定转染细胞，1）使用含相同剂量Zeocin的筛选培养基来维持培养；2）降低Zeocin剂量为原来的一半进行维持培养；3）使用正好能预防敏感细胞生长但不足以致死的Zeocin剂量来

性状：液体形式，浓度100mg/ml。
分子式：C₅₅H₈₃N₁₉O₂₁S₂Cu

保存：-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期为一年。