标题：常州百代生物BIOG组织DNA提取试剂盒说明书

产品介绍  

BIOG DNA Tissue Kit是我公司研发团队专为从各种组织样本中提取基因组DNA而设计。提取的样本范围包括各种动物组织、啮齿类动物尾巴、临床与法医样本、毛囊等。BIOG DNA Tissue Kit采用特制的复合消化液消化组织中的蛋白质，使组织DNA更容易释放出来，因而本试剂盒DNA提取产率较高。BIOG DNA Tissue Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方，提取得到的DNA纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染，可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。

操作步骤：

1. 请自行准备：无水乙醇、1.5mL离心管。

2. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：

a) 洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇。

b) 洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。

c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

3. 取10-20mg左右的组织，用液氮研磨为粉末，加入100 μL 生理盐水，振荡15秒；加入200 μL 裂解液， 20μL消化液A，振荡混匀，室温放置5分钟。

4. 加入20 μL 消化液B，充分混匀；56℃水浴60分钟至组织完全消化，5000rpm离心5分钟，将上清吸至1.5mL 离心管。

5. 加入200μL无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。

6. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

7. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

8. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

9. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。

10. 取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入50-200 μL洗脱液，静置3分钟，12,000 rpm  4℃ 离心2分钟，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

注意事项：

1. 一般动物组织消化需要较长时间，请根据具体材料调整。如鼠尾，可能需要消化过夜。

2. 使用本试剂盒，动物组织取样量不要超过25 mg；小鼠尾巴不超过0.8 cm；大鼠尾巴不超过0.5 cm。

3. 洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。