产品介绍  

BIOG DNA Cell Kit是专门用于从各种细胞样本中提取基因组DNA的试剂盒。提取的样本范围包括各种培养细胞、细菌、针刺吸取物、尿沉渣细胞等细胞离散标本。BIOG DNA Cell Kit采用复合消化液消化细胞中的蛋白质，使细胞DNA更容易释放出来，因而本试剂盒DNA提取产率较高。BIOG DNA Cell Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方，提取得到的DNA纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。 

操作步骤：

1. 请自行准备：无水乙醇、PBS及1.5mL离心管。

2. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：

a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。

b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。

c) 配制好的析出液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

3. 细胞处理：a) 培养板培养的单层贴壁细胞，弃培养基，PBS清洗一遍，弃PBS；

b) 培养瓶培养的贴壁细胞应先用胰酶消化，处理为细胞悬液， 1,000 rpm 离心 5分钟，彻底弃去上清，加入100μL PBS振荡至细胞悬浮；

c) 培养的细胞为悬浮细胞，1,000 rpm 离心 5分钟，彻底弃去上清，加入100μL PBS振荡至细胞悬浮。

4. 加入200μL裂解液，20μL消化液A，振荡混匀，室温放置5分钟。

5. 加入20 μL 消化液B，充分振荡混匀，56℃水浴10 分钟至细胞完全裂解。

6. 加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。

7. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

8. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

9. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。

10. 取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入50-200 μL 洗脱液，静置3分钟，12,000 rpm  4℃ 离心2分钟，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

注意事项：

1. 析出液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。

2. 细胞量建议不高于10⁷。

3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。