BIOG粪便DNA提取试剂盒说明书

运输条件：常温运输

货    号：51031: 50次反应 

          51032: 100次反应   储存条件：室温（15-25℃）消化液请于-20℃存放，裂解液Ⅰ请于4℃存放

 产品特点

◎操作简便快速，粪便预处理后，可在15分钟内完成操作；

◎提取DNA纯度高，无抑制剂，A260/A280为1.7-1.9；

◎产率高，同样的样本量提取的DNA更多。

  试剂盒组成

产品介绍  

BIOG DNA Stool Kit是我公司研发团队专为从粪便中提取基因组DNA而设计，适用于不同来源的固态或液态粪便样本。BIOG DNA Stool Kit采用了最新的离子膜技术并反复优化了裂解液和洗脱液配方，提取得到的DNA纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类、杂质污染，可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。

操作步骤：

1. 请自行准备：无水乙醇、PBS、1.5mL离心管。

2. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：

a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。

b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。

c) 配制好的析出液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

3. 取200mg的粪便于试管中(若粪便样本为液态，取200μL于试管中)，加入2mL PBS充分振荡混匀，300g离心5分钟，收集上清；取收集的上清液1mL于1.5mL离心管中，12000 rpm离心5分钟，弃上清后沉淀用1mL PBS重悬，振荡混匀后，12000 rpm离心5分钟，收集沉淀。

4. 加入200μL裂解液Ⅰ，悬浮沉淀，37℃放置30分钟。

5. 加入200 μL 裂解液Ⅱ，20μL消化液，充分振荡混匀，56℃水浴10 分钟。

6. 加入600μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。

7. 将吸附柱放入收集管内，取上述溶液600μL转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

8. 将剩余400μL液体转入上述吸附柱内，重复操作步骤7。

9. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。

10. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。

11. 取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-100 μL洗脱液，静置3分钟，12,000 rpm  4℃ 离心2分钟，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

注意事项：

/1、析出液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。

2、裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。