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生物器材论坛留言板『难题求援』 → BIOGHSC超级多重一步法荧光定量PCR试剂说明书

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标题: BIOGHSC超级多重一步法荧光定量PCR试剂说明书
czbiogen
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BIOGHSC超级多重一步法荧光定量PCR试剂说明书

BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit                                         

运输条件:干冰或蓝冰运输           

货    号: 41025  100个反应                                                       

        41026  250个反应                                              储存条件:-20℃ 

 产品特点

◎逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成,操作简便快速;

◎使用我们最新研发的超级热启动聚合酶,反应特异性更高,酶动力更强,特别适合多重PCR反应;

◎反应缓冲液经充分优化,灵敏度高,最低可检测1pg总RNA中的目标片段,特别适合低拷贝RNA的检测;                    

◎添加了百代生物RT-PCR专利活素,可明显提升RT-PCR的产量,CT值一般早3-5循环,S型曲线更加典型。 

2xBIOGHSC Super MultiProbe  Mix

10μl

BIOGHSC Super Enzyme Mix

0.5μl

RT-PCR Enhancer

0.25ul

上下游引物 (10μM)

0.6μl

TaqMan Probe (10μM)

0.5μl

模板RNA

10ng-1μg

RNase free ddH2O

加至20μl

说明:1、BIOGHSC Super MultiProbe Mix包含dNTP Mix和Mg2+,BIOGHSC Super Enzyme Mix包含BIOG超级逆转录酶和BIOG超级热启动聚合酶、荧光保护素。2、一般来说反应体系中引物终浓度为0.3μM可得到较好的扩增效果。进行多重PCR反应时,不同靶基因引物的浓度搭配可以在0.1-1.0μM范围内进行实验优化。 3、TaqMan探针终浓度可以在0.1μM-0.45μM之间调整,进行多重PCR反应时,不同靶基因探针的浓度搭配应进行实验优化。4、qPCR反应灵敏性高,模板量的准确性对结果影响很大,建议将模板适度稀释后加入,或用50ul反应体系。5、模板体积最好不超过反应体积的10%。6、扩增产物长度请选择在100bp-500bp范围内,最好为100-200bp。7、配制反应体系时,避免震荡混匀,以防气泡产生。8、反应条件:先于42℃逆转录反应20分钟,再于95℃加热10分钟,以激活热启动DNA聚合酶,然后95℃15秒,55-65℃ 30-60秒,40-45个循环。该反应条件可根据目标片段的大小、引物的Tm值、检测基因的多少等适当调整。8、如果模板具有复杂二级结构,可将反应温度提高至55℃,有助于提高产量。

储存和稳定性 

干冰或蓝冰运输,-20°C 储存,避免反复冻融 。 

如每次使用量较少,推荐小份分装使用。

有效期

-20℃保存条件下,有效期为1年。

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶,RNase残留。

注意

本产品仅用于科研

 常州百代生物科技有限公司

地址:常州市东方东路51号新东方物流园   电话: 0519-88050392     传真: 0519-83382790                     

 常州百代生物科技有限公司

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2017-3-10 10:37:00
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