以文本方式查看主题 - 生物器材论坛 (http://bbs.bio-equip.com/index.asp) -- 『难题求援』 (http://bbs.bio-equip.com/list.asp?boardid=4) ---- [分享]胰酶消化传代的最佳浓度~是否应含EDTA~ (http://bbs.bio-equip.com/dispbbs.asp?boardid=4&id=115484) |
-- 作者:钰森 -- 发布时间:2018-1-5 10:51:00 -- [分享]胰酶消化传代的最佳浓度~是否应含EDTA~ 胰酶消化传代的浓度是多少?是否含EDTA?浓度? 胰酶消化传代的一般浓度为0.25%,部分细胞由于贴壁较紧,需要加0.53mM 的EDTA,如果做原代培养,胰酶的浓度需要做适当的提高。 细胞传代消化时所用胰酶浓度并不是越高越好,因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。 通常使用的消化液浓度为: (上海钰森生物 usen2003 ) |