BIOG RNA Swab Kit是常州百代生物科技有限公司研制的专门用于提取各种口腔拭子、泌尿生殖道拭子及痰液样本中的RNA的试剂盒。BIOG RNA Swab Kit采用了最新的优质进口离子膜，裂解液和洗脱液经过多次优化，能高效地分离RNA。提取得到的RNA较其它品牌的同类试剂盒产量更大，纯度更高，最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于Northern 杂交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文库构建、体外翻译等各种常规分子生物学实验。

操作步骤

1. 请自行准备：无水乙醇、生理盐水、1M NaOH、无RNA酶1.5mL离心管。

2. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：

a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。

b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。

c) 配制好的析出液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。

3. 样本处理：a) 拭子：向无RNA酶的1.5mL离心管中加入800μL生理盐水，将拭子收集的样本置于生理盐水中，涮洗20秒，使细胞完全脱落，贴离心管壁挤干拭子上的液体，12,000 rpm 离心5 min，弃700μL上清，剩余100μL上清，充分振荡混匀。

             b) 痰液：向收集的痰液中加入4倍体积1M NaOH，室温放置30分钟，每10分钟振荡混匀一次，12,000 rpm离心5 min，弃上清，加入0.5mL生理盐水，混匀，12,000 rpm离心5 min，弃400 μL上清，剩余100μL上清，充分振荡混匀。

4. 加入200μL 裂解液和20μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。

5. 加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。

6. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液吸入吸附柱内，静置2 min，12,000 rpm 4℃离心1 min，弃收集管内废液。

7. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 min，弃收集管内废液。

8. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 min，离去残留的洗涤液。

9. 取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-50 μL 洗脱液，静置3 min，12,000 rpm 4℃ 离心2 min，收集RNA溶液。

10. -70℃保存，或直接用于下一步实验。

注意事项： 

1. 为防RNA酶污染，实验过程中最好戴一次性干净手套、口罩，使用处理过的无RNA酶的容器和无RNA酶的超纯水 。

2. 析出液、洗涤液均含有刺激性化学物质，请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清

水或生理盐水冲洗，必要时请就医。 

3. 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。

储存、运输和有效期

本试剂盒可常温运输，室温（15-25℃）保存，有效期为12个月，消化液请于-20℃存放，避免反复冻融。

质量控制

本产品经严格的质量检验证明，无生物污染

注意 ：本产品仅用于科研