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细胞计数问题,需要实用的细胞计数仪器
评论对象: polly | 2018-8-9 17:58:00
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评论对象: polly | 2018-8-9 17:58:00
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个人认为,应把该问题一分为二来讨论。首先,对于细胞数量巨大的总体,就目前的科技水平而言,只能通过统计学方法进行样本对总体的估计,虽无法做到与真实值的完全一致,但在确保各方法的取样、前处理过程得当的前提下,所得数据是具有统计学意义的,可以代表总体真实值,相差若干数量级的误差并无显著影响,过分追求庞大总体的真实值的讨论意义不大。在真假、死活细胞的判定上,目前计数器厂商也都有各自的鉴别方法,比如光学、电学等,以最大限度降低这类错误的发生。
其次,对于几百至几千个的少量细胞精确技术而言,不知能否将您建议的方法理解为“带整底布局计数网格的细胞培养板”,个人认为,在理论上该方法是可行的,但在技术层面和成本上可能还存在一些问题:
1. 培养板底部需要完整布局显微级别的精密计数网格,至少需要20X到40X的显微精度,不可能通过塑模一次成型,必然需要二次高精度工艺处理,对于培养板这种低值耗材来说,成本将翻数倍。另外站在生产厂家的角度,考虑到耗材的通用性,这种新型耗材的量产也可能受限。如果经费宽裕,该问题可以通过个性化定制来解决,利润可观的情况下肯定会有公司接受特殊需求。
2. 计数操作方法上,宏观与微观兼顾也有一定难度,低倍率的方法无法精确检测细胞,高精度光学和图像等分析技术(40X、100X)无法快速、大面积扫描整个培养板底部来精确计数所有细胞,人工计数在大批次实验中几乎又是不可能完成的。另外,底部表面积、沉降率、堆积重叠等问题仍然存在,其造成的计数错误对少量样品的计数影响显著。