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评论主题: 细胞计数问题,需要实用的细胞计数仪器
评论对象: equip | 2018-8-2 18:32:00
评论言论:

流式细胞计数仪,以B.Dtc20-automated-cell-counter 为例,是一种基于库尔特原理的细胞计数仪。库尔特原理认为,悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔管时,取代相同体积电解液,导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲,脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。这类细胞计数仪是根据细胞通过小孔引起电位变化计算细胞个数。仪器根据细胞体积大小设定脉冲信号上下限,在上下限之间的颗粒信号作为细胞记录,大于上限和小于下限的颗粒信号不作为细胞记录,与颗粒的颜色、形状、性质无关。这种计数方法不能区分细胞与非细胞颗粒,体积与细胞大小相同的非细胞颗粒也作为细胞记录下来。这类细胞计数仪的优点是,自动化程度高,快速方便,样本体积计量准确;主要问题是存在非细胞颗粒造成的假性细胞,细胞粘结造成细胞计数减少。所以这类细胞计数仪测量的细胞密度准确度或真实性不高。另一个问题是检测样本细胞数不能太少,而且计数的细胞样本不能回收再用,要求检测细胞浓度在细胞数/毫升  1 x 1055 x 106范围内。

细胞自动计数分析仪(Cellometer ),是基于图像分析的细胞计数仪。计数原理类似与血球计数板,只是用用仪器摄像代替人眼观察计数。加20ml样本到计数仪计数板的样品室内,使细胞平铺为单层细胞,将计数板放入计数仪内,仪器摄像头自动观察和记录样品室内的细胞,通过电脑显示细胞图象,自动分析细胞图象、细胞大小和细胞浓度。该仪器的细胞计数方法不是记录样品室内的全部细胞,只是选取样品室内细胞分布的几个视野,分析视野内的细胞图像,确定细胞数。仪器设定一个视野面积近似于血球计数板一个白细胞计数单位的面积,样品室内液体深度是多少,等不等于血球儿计数板样品池深度0.1mm?视野面积与样品深度构成的体积等不等于血球计数板一个白细胞计数单位的体积?都不明确。所以计量样品的体积是一个问题;样品室内细胞分布不一定均匀,用一个视野内的细胞密度代表整体细胞密度也是一个问题。为什么不记录全部样品细胞?如果能够准确记录全部样品室内的细胞,加入的样品量(20ml)准确,得到的细胞密度自然准确。不能记录全部样品细胞,准确加入的样品量(20ml)不用,改用一个不确定样品体积计算密度,是该仪器设计的最大败笔。

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